蚌埠医学院学报

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干扰LncRNA LRRC75A-AS1抑制肺癌细胞发生发展研究

吴迪, 沈兆坤, 陈聪

2022, 47(4): 442-446. doi: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2022.04.005

关键词: 肺肿瘤, LncRNA LRRC75A-AS1, miR-22-3p, 增殖, 凋亡, 迁移

[摘要]()

目的探讨LncRNA LRRC75A-AS1/miR-22-3p对肺癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响及其可能作用机制。方法采用qRT-PCR法检测肺癌组织与癌旁组织中LRRC75A-AS1、miR-22-3p的表达水平；体外培养人肺癌细胞A549，si-NC、si-LRRC75A-AS1、si-LRRC75A-AS1与anti-miR-NC、si-LRRC75A-AS1与miR-22-3p inhibitor转染入A549细胞；采用qRT-PCR法检测A549细胞中LRRC75A-AS1、miR-22-3p的表达水平；采用MTT实验与平板克隆形成实验分别检测细胞增殖及克隆形成能力；采用流式细胞术检测细胞凋亡率；采用划痕实验检测细胞迁移能力；双荧光素酶报告实验检测LRRC75A-AS1与miR-22-3p的靶向关系；Western blotting法检测Cleaved-caspase3蛋白表达量。结果与癌旁组织比较，肺癌组织中LRRC75A-AS1的表达水平[(1.01±0.13)vs(4.59±0.34)]升高(P < 0.01)，miR-22-3p的表达水平[(1.00±0.12)vs(0.28±0.04)]降低(P < 0.01)；与si-NC组比较，si-LRRC75A-AS1组细胞存活率[100%vs(54.45±2.21)%]降低(P < 0.01)，克隆形成数[(121.00±5.10)个vs(58.67±2.49)个]减少(P < 0.01)，凋亡率[(8.42±0.34)%vs(25.59±0.80)%]升高(P < 0.01)，Cleaved-caspase3蛋白水平[(0.20±0.01)vs(0.68±0.05)]升高(P < 0.01)，划痕愈合率[(66.71±1.43)%vs(32.56±0.95)%]降低(P < 0.01)；双荧光素酶报告实验证实LRRC75A-AS1可充当miR-22-3p的竞争性内源RNA；与si-LRRC75A-AS1+anti-miR-NC组比较，si-LRRC75A-AS1+miR-22-3p inhibitor组细胞存活率[(54.61±2.28)%vs(88.75±3.22)%]升高(P < 0.01)，克隆形成数[(57.67±2.49)个vs(106.67±3.68)个]增多(P < 0.01)，凋亡率[(25.63±0.99)%vs(13.11±0.55)%]降低(P < 0.01)，划痕愈合率[(32.52±0.98)%vs(55.30±1.18)%]升高(P < 0.01)，Cleaved-caspase3蛋白水平[(0.67±0.06)vs(0.30±0.03)]降低(P < 0.01)。结论干扰LRRC75A-AS1表达可能通过上调miR-22-3p从而减弱肺癌细胞增殖、迁移及克隆形成能力，并能够诱导细胞凋亡。

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